高灵敏度人CRP定量检测试剂盒

高灵敏度人CRP定量检测试剂盒
应用目的
HelicaCRP的反应为了检测和定量测定人血清中的CRP。CRP是由肝脏在发炎，细菌感染或组织创伤等状况下产生的一种急性期蛋白。CRP的定量被用于确定难以疹断的炎症状况和检测病人在治疗中的反应。
临床相关性
CRP紧随着组织创伤开始在肝脏中合成。在此情况下它被视为一种重要的急性期标记。
检测原理
将人血清按1:4 000稀释，然后用来与覆盖在经特殊处理的微孔上的抗体进行反应。经适当培养后，对该微孔板进进行冲洗以除去未与抗体结合的人血清蛋白，接着加入经酶标记的兔抗人CRP与该抗原抗体复合物进行反应并对其进行标记。经过一段时间培养后，再次对微孔板进行了冲洗以除去未反应的结合物。加入尿素过氧化物的底物和TMB作为媒染剂来触发染色。出现蓝色表示阳性反应，而不变色或只产生微弱的蓝色代表阴性反应。用一种能将阳性反应的蓝色变为黄色的终止试剂对该反应进行终止。阴性反应依旧无色或只显淡淡的黄色。光密度用分光光度计在OD450处检测或用ELISA读取器读取。对光密度的半定量可用标准曲线来完成，而此标准曲线是用标准液经2倍稀释后做出的。
试剂盒组成
Helica C-Reactive Protein kit 为96检测提供足够的材料。
1、CRP ELISA 微板：96孔板，包含经纯化的兔抗人CRP-IgG与干燥剂共同包装待用。
2、结合物（100×）0.13 mL：用经浓缩和纯化的山葵过氧化物酶标记兔抗人CRP-IgG，其中添加稳定剂和防腐剂。闭光保存。
3、 CRP 标准, 1.0ug/mL (100×), 0.13 mL：人血清中具有高浓度的CRP。用3倍稀释对样品进行四次系列稀释，把标准品稀释到1：100作为第一个蛋白样品标准。
4、清洗缓冲液 1包：磷酸缓冲液加入0.05%吐温20，调pH至7.4，然后用重蒸水定容到1L。
5、TMB底物 12mL：包含尿素过氧化物和TMB的溶液。棕色瓶中闭光保存，备用。非致癌。
6、终止溶液 12mL：经稀释的磷酸。备用。
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